Kit Assay Gene Gohebydd Mono-Lumi Ranilla Luciferase

 

Enw Cynnyrch	Cath. Nac ydw.	Spec.
Kit Assay Gene Gohebydd Mono-Lumi Ranilla Luciferase	G1703-100T	100T

 

 

Defnyddir system Luciferase yn bennaf ar gyfer canfod genynnau gohebydd. Mae elfennau rheoleiddio trawsgrifiadol y genyn targed yn cael eu clonio i mewn i fyny'r afon ac i lawr yr afon o Luciferase i adeiladu plasmid genyn gohebydd. Yna caiff y plasmid ei drosglwyddo i gelloedd, ac ar ôl trin y celloedd trawsgludedig â chyffuriau neu symbylyddion eraill, caiff y celloedd eu casglu a'u lysed, a mesurir gweithgaredd luciferase yn y lysate. Mae rheoleiddio trawsgrifio effaith genynnau targed o symbyliadau alldarddol megis cyffuriau yn cael ei bennu gan weithgaredd luciferase.

 

Mae Kit Assay Gene Gohebydd Mono-Lumi Ranilla Luciferase, gan ddefnyddio Ranilla Luciferase, yn cataleiddio ocsidiad swbstrad Coelenterazine i Coelenteramide ym mhresenoldeb ocsigen, ac yn cynhyrchu biofflworoleuedd yn y broses, Yr egwyddor bod y dwyster fflworoleuedd a gynhyrchir yn gymesur â'r gweithgaredd luciferin. canfod yn gyflym. Nodweddir y citiau gan ganfod cyflym, sensitifrwydd uchel ac ystod canfod eang.

 

 

Llong gyda rhew sych; Storio -80 gradd i ffwrdd o olau am 12 mis; -20 storfa graddau i ffwrdd o olau, argymhellir i'w ddefnyddio o fewn 6 mis.

 

 

Rhif Cydran	Cydran	G1703-100T
G1703-1	Clustog Cell Lysis	50 ml
G1703-2	Is-haen Adwaith Ranilla Luciferase (50×)	200 μL
G1703-3	Clustogi Ymateb Ranilla Luciferase	10 ml
Llawlyfr		1 pc

 

 

1. Paratoi datrysiad gweithio Adwaith 1 × Ranilla Luciferase:

1.1. Mae'r pecyn yn cael ei ddadmer ar dymheredd ystafell, a'i gymysgu wyneb i waered i sicrhau bod pob cydran wedi'i doddi'n llwyr. Dylid dadmer yr Is-haen Adwaith Ranilla Luciferase (50 ×) ar rew a'i allgyrchu'n fyr i sicrhau bod yr adweithydd yn suddo i waelod y tiwb;

1.2. Mae Is-haen Adwaith Ranilla Luciferase (50 ×) yn cael ei wanhau 50-plyg gyda Chlustogiad Adwaith Ranilla Luciferase, hy, 10 μL Ranilla Luciferase Reaction Substrate (50 ×) yn gymysg â 490 μL Ranilla Luciferase Reaction Buffer i gael 500 μL × Ateb gweithio Adwaith Ranilla Luciferase;

Nodyn: Paratowch yn ôl dos er mwyn osgoi gwastraff. 1 × Ranilla Luciferase Argymhellir bod datrysiad gweithio Adwaith yn cael ei baratoi a'i ddefnyddio nawr.

2. pretreatment cell a lysis:

2.1. Mae celloedd yn cael eu mewnblannu yn y platiau cyfatebol, ac yn cael eu traws-drin neu rag-driniaethau cysylltiedig eraill yn unol â'r anghenion arbrofol;

2.2. Ar gyfer celloedd ymlynol: ar ôl cael gwared ar y cyfrwng diwylliant celloedd gwreiddiol, ychwanegwch y swm cyfatebol o Cell Lysis Buffer yn ôl y tabl isod i gwmpasu'r celloedd; Ar gyfer celloedd crog, trosglwyddwch y celloedd i mewn i tiwb centrifuge, centrifuge i gael gwared ar y cyfrwng, ac ychwanegu y swm cyfatebol o Cell Lysis Buffer i ail-ddarparu'r celloedd yn ôl y tabl isod;

 

Plât Diwylliant Cell	Cell Lysis Byffer/ffynnon
6-wel	500 μL
12-wel	300 μL
24-wel	200 μL
48-wel	150 μL
96-wel	100 μL

 

2.3. Ar ôl digon o lysis ar gyfer 10-20 min ar dymheredd yr ystafell, mae celloedd yn cael eu crafu a'u casglu mewn tiwb centrifuge 1.5 mL, wedi'i allgyrchu ar 4 gradd, 12000 g am 10 munud, a chedwir y supernatant (cell lysate) at ddefnydd sbâr;

3. Canfod Ranilla Luciferase:

3.1. 1 × Ranilla Luciferase Mae hydoddiant gweithio Adwaith a baratowyd ymlaen llaw yn cael ei adfer i dymheredd yr ystafell a'i ychwanegu at blât ffynnon gwyn afloyw 96- ar 100 μL/wel;

3.2. Mae'r uwchnatant lysis cell a gedwir yng ngham 2 yn cael ei ychwanegu at y plât ffynnon 96- uchod ar 20 μL/ffynnon;

3.3. Mae'r osciliad llorweddol yn unffurf, ac mae'r canfod cemiluminescence yn cael ei berfformio ar unwaith gyda'r Luminomedr, y label ensym amlswyddogaethol gyda'r modiwl canfod cemiluminescence neu offerynnau eraill sy'n gallu canfod bioymoleuedd,

 

 

1. Cyn ei ganfod, mae angen adfer yr ateb gweithio Adwaith 1 × Ranilla Luciferase i dymheredd yr ystafell cyn ei ddefnyddio.

2. Mae gan Ranilla Luciferase Reaction Buffer rywfaint o wlybaniaeth ar ôl dadmer, sy'n ffenomen arferol, a dylid ei ysgwyd yn dda cyn ei ddefnyddio i sicrhau ei fod wedi'i ddiddymu'n llwyr.

3. Wrth gynnal canfod aml-sampl, dylid rheoli ychwanegu datrysiad gweithio Adwaith 1 × Ranilla Luciferase o fewn cyfnod byr cyn belled ag y bo modd, Argymhellir defnyddio pibed aml-sianel ar gyfer ychwanegu sampl a thalu sylw i weld a yw'r sugno mae cyfaint pob ffynnon o'r pibed yn gyson.

4. Er mwyn atal ymyrraeth rhwng ffynhonnau, argymhellir defnyddio platiau ffynnon gwyn afloyw. Gellir defnyddio platiau du afloyw hefyd, ond bydd du yn amsugno'r signal fflworoleuedd ac yn lleihau'r signal fflworoleuedd a ganfyddir.

5. Er eich iechyd a'ch diogelwch, gwisgwch gôt labordy a menig yn ystod y llawdriniaeth.

 

At Ddefnydd Ymchwil yn Unig!

 

 

Tagiau poblogaidd: mono-lumi ranilla luciferase gohebydd pecyn assay genyn, Tsieina mono-lumi ranilla luciferase gohebydd genynnau pecyn assay cit gweithgynhyrchwyr, cyflenwyr, ffatri